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貝爾搖床的細胞比例對增強其毒性分析

返回列表 來源:未知 發布日期:2020-11-23 08:54【

對象與方法


注射用醋酸西曲瑞克(GnRH-ant,Merck,德國), 人絕經期尿促性腺激素(human menopausal gonadotropin, HMG,麗珠醫藥集團股份有限公司),人絨毛膜促性腺激 素(human chorionic gonadotropin,HCG,麗珠醫藥集團 股份有限公司)。胞內染色試劑盒(BioLegend,美國), Annexin Ⅴ染色試劑盒 [ 賽默飛世爾科技(中國)有限公 司 ]。5- 溴脫氧尿嘧啶核苷(5-bromodexyuirdine,BrdU, Sigma,美國),Ⅳ型膠原酶(Sigma,美國)。搖床(海門市其林貝爾儀器制造有限公司),低溫離心機(Eppendorf, 德國),流式細胞儀(BD,美國)。使用眼科剪將收集的小 鼠子宮組織剪碎至約 1 mm3 碎塊,經Ⅳ型膠原酶消化后 加入含 5% 胎牛血清培養液終止消化。


結果


以 CD45、CD3 和 NK1.1 標記小鼠 uNK 細胞后,采 用熒光標記的磷脂結合蛋白 Annexin Ⅴ染色,并用流式細 胞術檢測 GnRH-ant 對 uNK 細胞凋亡的影響。結果顯示,與對照組相比,GnRH-ant 組小鼠 uNK 細胞凋亡水 平下降(P=0.004)。Pf 和 Gz-B 是 NK 細胞發揮毒性作用的主要細胞因 子,本研究對小鼠 uNK 細胞內的這 2 個因子的表達水平 進行分析,結果顯示,與對照組相比,GnRH-ant 組小鼠 uNK 細胞內 Pf(P=0.000)和 Gz-B(P=0.034)的 表達水平均較高。近年來,GnRH-ant 方案憑借其簡便、靈活、安全、有 效等優勢在輔助生殖領域得到了廣泛應用,但 GnRH-ant 對內膜容受性的不利影響使得該方案的胚胎種植率及臨床 妊娠率偏低 。與自然周期方案 組相比,GnRH-ant 方案組子宮內膜中多種與細胞黏附、信 號轉導及 T 細胞受體信號通路相關的基因表達發生了顯著變化






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