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對Hg2+的檢測(其林貝爾Ql-866使用)

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2019-11-14 10:13【

汞是污染最為普遍、毒性最強(qiáng)的重金屬,對人體健康造成了極大危害。傳統(tǒng)的 Hg2+ 檢測方法如電 感耦合等離子體發(fā)射光譜法、原子熒光法、火焰原子吸收光譜法等已在實(shí)際檢測中得到很好的應(yīng)用。 此外,采用諸如熒光分析、電化學(xué)傳感等技術(shù)進(jìn)行 Hg2+ 的快檢方法也得到廣泛報(bào)道,這些方法在一 定程度上實(shí)現(xiàn)了對 Hg2+ 的 快 速 靈 敏 檢 測。即 便 如 此,繼續(xù)尋找高效快速的分析方法仍然是研究者在 Hg2+ 檢測中一直努力的方向。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

FS5型熒光光譜儀(英國,Edinburgh公 司);AVATAR360型 傅 立 葉 變 換 紅 外 光 譜 儀(美 國,Nicolet 公司);TECNAIG2F20型高分辨率透射電子顯微鏡(美國,FEI公司);其林貝爾QL-866型振蕩器(江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司);KQ520DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。 牛血清白蛋白(BSA)、HAuCl4·3H2O 購 自 美 國 Sigma-Aldrich 公 司;NaOH、Na2 HPO4·12H2O, NaH2PO4·12H2O、AgNO3、Hg(NO3)2等購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;其余試劑均為分析純。水為 去離子水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 BSA-Au/AgNCs的合成

所有用于合成 BSA-Au/AgNCs的玻璃器皿事先都先用王水浸泡4h,然 后用乙醇漂洗,最后用水沖洗干凈。合成方法參考方法。將5.0mL50mg/mLBSA 溶液和4.0 mL1.0×10-2 mol/L HAuCl4溶液混合,接著加入1.0mL不同濃度的 AgNO3溶液,室溫振蕩10min,立 即加入1.0mL1.0×10-3 mol/LNaOH 溶液,在37℃下反應(yīng)12h。將反應(yīng)液先使用30000MW 的濾膜處 理,4℃下3000r/min離心15min,去除未反應(yīng)的BSA。再使用水對其透析48h(每6h換一次水),以除 去未反應(yīng)的 HAuCl4和 NaOH。最后將得到的 BSA-Au/AgNCs溶液4℃放置以備用。取1mL 溶液凍 干后稱重,計(jì)算得到最終 BSA-Au/AgNCs母液的濃度為3.4mg/mL。

1.2.2 Hg2+ 的熒光檢測

取100μL上述 BSA-Au/AgNCs溶液,加900μL濃度為2.0×10-2 mol/L 磷 酸鹽緩沖液(PBS,pH=7.0),得到濃度為0.34mg/mL的BSA-Au/AgNCs溶液。分別移取1μL不同濃 度的 Hg2+ 溶液加入到1mL上述 BSA-Au/AgNCs溶液中,進(jìn)行熒光測定。

2 結(jié)果與討論

圖1A 為 BSA-Au/AgNCs在激發(fā)波長280nm 處的熒光光譜圖,由圖可見最大發(fā)射波長為625nm。 這些熒光特征與報(bào)道的基本一致,表明實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成功合成了 BSA-Au/AgNCs。日 光 下 制 備 的 BSA-Au/AgNCs呈棕黃色(如圖1A 插圖a),而在365nm 的紫外燈下顯示出很強(qiáng)的橘紅色熒光,如圖1 插圖b所示。 圖1 BSA-Au/AgNCs的熒光光譜(A)和紅外光譜(B)圖 Fig.1 Fluorescencespectra(A)andIRspectra(B)ofBSA-Au/AgNCs InsetainFig.A:ImageofBSA-Au/AgNCsunderthedaylightlamp;Insetb:ImageofBSA-Au/AgNCsunder365nm UVlight; Insetc:HRTEMimageofBSA-Au/AgNCs. 利用高分辨透射電鏡(HRTEM)研究了合成的 BSA-Au/AgNCs的尺寸。如圖1插圖c所示,可以觀 察到合成的 BSA-Au/AgNCs尺寸約4nm,表明 BSA-Au/AgNCs具有高度結(jié)晶的結(jié)構(gòu)。利用紅外光譜 表征了 BSA-Au/AgNCs的結(jié)構(gòu)信息,結(jié)果如圖1B所示。其中曲線a為 BSA-Au/AgNCs的紅外譜,曲線 b為 BSA 的紅外光譜。與 BSA 的紅外光譜相比,BSA-Au/AgNCs的紅外光譜在1654cm-1的特征吸收 峰有較為明顯的減弱,這表明反應(yīng)后蛋白質(zhì)的α 螺旋結(jié)構(gòu)減少了,蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,同時(shí)在 蛋白質(zhì)中巰基與 Au、Ag形成共價(jià)鍵。


3 結(jié)論

BSA 為模板,以 HAuCl4 和 AgNO3 為原料,合成了一種高熒光強(qiáng)度的 Au、Ag合金簇 BSA- Au/AgNCs。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),由于 Hg2+ 與 BSA-Au/AgNCs表面的 Au+ 存在的高特異性的噬金屬效應(yīng),因而 能顯著猝滅合金簇的熒光信號。進(jìn)一步以該 BSA-Au/AgNCs為熒光探針,開發(fā)了一種快速檢測 Hg2+ 的方法。該檢測方法操作簡單,快速,靈敏度較高,不需復(fù)雜儀器;同時(shí),合成的合金簇綠色環(huán)保。



 


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